一次性筷子第2部分：竹筷志贺氏菌检测

发布时间：2026-09-10 作者：中析研究所浏览：

竹筷作为一次性筷子中的主要品类，直接接触入口食品，其表面卫生状况与致病菌污染风险密切相关。志贺氏菌是常见的肠道致病菌之一，一旦随餐具进入人体，可引发细菌性痢疾等肠道传染病。本文围绕竹筷志贺氏菌检测，依次介绍检测原理与机制、样品采集与制备、分离培养与生化鉴定、PCR快速检测、ELISA法与联检指标，以及检测性能指标与卫生判定标准，为生产质量控制与市场监管检验提供系统的方法参考。

检测原理与机制

志贺氏菌属于肠杆菌科志贺氏菌属，为革兰氏阴性无芽孢杆菌，兼性厌氧。其检测原理建立在该菌的生理生化特性与抗原组成之上：一方面利用选择性培养基中的抑菌成分抑制杂菌生长，使目标菌得以富集并形成典型菌落；另一方面依据菌体抗原（O抗原）的血清学分型特征，借助特异性抗体凝集反应确认菌种归属。分子检测法则以核酸为目标，针对志贺氏菌保守基因序列设计引物与探针，经体外扩增后依据扩增产物判定结果。免疫学方法以抗原抗体特异性结合为基础，将酶催化显色反应与信号强度相关联，实现定性或定量分析。

样品采集与制备要求

采样应在无菌条件下进行，按批次随机抽取竹筷样品，封装于无菌袋中并及时送检，运输过程避免高温与挤压污染。制备时以无菌操作剪取适量样品，置于无菌容器中，加入适量灭菌磷酸盐缓冲液或生理盐水，充分振荡洗脱，使竹筷表面附着的微生物转移至液体中，形成样品洗脱液。洗脱液可直接用于增菌培养，也可分装后分别用于分子检测与免疫学检测。整个制备过程须在洁净环境中完成，所用器具均须灭菌处理，并设置空白对照以排除操作环节引入的污染干扰。

志贺氏菌分离培养与生化鉴定

经典培养法遵循增菌、分离、鉴定三个步骤。样品洗脱液先接种于志贺氏菌增菌液中，于适宜温度下振荡培养，使受损菌体复苏并繁殖。增菌培养物划线接种于选择性分离平板，经培养后观察菌落形态，志贺氏菌典型菌落多呈圆形、光滑、半透明。挑取可疑菌落转种三糖铁琼脂与营养琼脂斜面，进行初步生化筛选，再经系统生化试验核实其不产气、不产硫化氢、发酵葡萄糖等特征。终以志贺氏菌诊断血清进行玻片凝集试验，生化特征与血清凝集结果相符方可判定为志贺氏菌。

PCR法快速检测志贺氏菌

PCR法以志贺氏菌特异性基因片段为扩增靶标，常用的靶基因侵袭性质粒抗原相关基因与毒性相关保守序列。检测流程为：取增菌培养物或样品洗脱液提取基因组DNA，以特异性引物进行体外扩增，反应结束后经凝胶电泳或荧光信号采集分析扩增结果。若扩增曲线与预期片段大小相符，且阴性对照无扩增、阳性对照扩增正常，可判定为初筛阳性。初筛阳性样品仍须结合传统分离培养与生化鉴定加以确证。PCR法灵敏度高、检测周期短，适用于大批量样品的快速筛查与生产环节的卫生监控。

ELISA法与联检指标应用

ELISA法将志贺氏菌特异性抗体包被于固相载体，加入待测样品后，目标抗原与抗体结合，再经酶标记二抗与底物显色，依据吸光度值判定结果。该方法操作相对简便，可实现批量样品的并行检测，适用于增菌产物的快速初筛。在实际应用中，志贺氏菌常与沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌组成联检指标体系，一次性筷子类产品的卫生检验通常按致病菌组合项目开展。联检模式可共享增菌与样品制备环节，减少重复操作，兼顾检测效率与综合卫生评价需求。ELISA阳性结果同样须经生化鉴定或血清学试验确证。

检测性能指标与卫生判定标准

方法学评价通常涵盖灵敏度、特异性、检出限、准确度与重复性等指标。灵敏度指方法对目标菌的检出能力，特异性指对非目标菌不产生交叉反应的能力，检出限反映可检出的低菌量水平。定性检测中，阳性与阴性符合率为衡量准确度的主要参数。竹筷志贺氏菌的卫生判定依据一次性餐具相关卫生标准执行，致病菌指标一般为不得检出，即按规定的取样量与检验方法，在样品中检出志贺氏菌即判定该批次不合格。报告应注明检验方法、样品状态与判定依据，检测过程须设置阳性对照、阴性对照与空白对照，以保证结果可靠可溯。