卫生用品用无尘纸卫生指标（细菌菌落总数、大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、真菌菌落总数）检测

发布时间：2026-09-09 作者：中析研究所浏览：

卫生用品用无尘纸是卫生巾、纸尿裤、湿巾等产品的重要衬垫与吸收材料，其微生物卫生状况直接关系使用部位皮肤与黏膜的安全。围绕细菌菌落总数、大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌及真菌菌落总数六项指标，本文按样品制备、检测方法、结果判定的顺序展开，覆盖平板计数、选择性培养与 PCR 分子鉴定等手段，为无尘纸生产质量控制与卫生合规评价提供系统的检测路径。

检测原理与机制

无尘纸卫生指标检测以微生物学方法为主体。菌落总数与真菌菌落总数依托活菌培养计数原理，即在适宜温度与培养基条件下，样品中每个活菌细胞或孢子经繁殖形成肉眼可见菌落，依据菌落数推算单位样品中的活菌数量。大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌与溶血性链球菌四类致病菌检测，则结合选择性培养基的生理生化特性与菌落形态观察实施初筛，再经生化试验或分子生物学方法确认。PCR 技术基于核酸扩增原理，针对致病菌种属特异性基因片段设计引物，可在数小时内完成定性判定，适用于快速筛查与培养结果的印证。

样品制备与采样要求

采样应在洁净环境下以无菌操作进行。抽样时佩戴无菌手套，从同一批次中随机抽取独立包装样品，避免手部与样品表面直接接触。送检过程中保持原包装密封完整，样品运输宜在常温干燥条件下尽快完成，防止微生物繁殖或死亡导致结果失真。实验室接收样品后，在无菌条件下称取规定质量的无尘纸，剪碎后置于含无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的容器中，充分振荡混匀，使纸样中微生物均匀释放至稀释液中，制成初始悬液。此悬液再按十倍梯度逐级稀释，供后续各项检测使用。稀释操作须记录级别，避免混淆。

菌落总数测定——平板计数法

细菌菌落总数采用平板菌落计数法测定。取适宜稀释度的样品悬液，以倾注法或涂布法接种于平板计数培养基，每个稀释度做平行样，同时设置空白对照。培养基凝固后将平板倒置于恒温培养箱中，在规定的温度与时间条件下培养。培养结束后计数平板上的菌落，依据稀释倍数与接种量换算为每克样品的菌落总数。计数时选取菌落数在适宜区间内的平板，取平行平板均值计算。若平板蔓延菌落超过一定比例或存在片状生长，应判为无效并复测。操作全程须防止环境微生物污染。

致病菌检测——PCR与培养法

四项致病菌检测采用培养法与 PCR 相结合的路线。培养法方面，样品悬液先接种于相应增菌液中进行前增菌与选择性增菌，铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌分别转种至各自的选择性分离平板，观察典型菌落形态，挑取可疑菌落进行生化鉴定与凝固酶等确认试验。溶血性链球菌检测注重血平板上的溶血特征，结合革兰染色镜检与生化反应确认。PCR 法针对各菌的特异性基因序列设计引物，对增菌培养物或样品悬液提取核酸后扩增，经电泳或荧光信号判读结果。阳性扩增须结合培养分离予以证实，防止死菌核酸导致的假阳性判定。

真菌菌落总数测定方法

真菌菌落总数测定原理与细菌计数类似，区别在于培养基与培养条件。样品稀释液接种于马铃薯葡萄糖琼脂或沙氏培养基等适合真菌生长的培养基，添加细菌抑制剂以抑制细菌繁殖，在较低温度、较长时间条件下培养。培养期间观察菌落形成情况，计数霉菌与酵母菌菌落，按稀释倍数换算为每克样品的真菌菌落总数。计数时以菌落清晰可辨、无相互融合为前提。若菌落蔓延成片，应记录并重新稀释测定。真菌检测的无尘纸样品应关注受潮与储存环节，因真菌在潮湿环境中更易繁殖，采样后须及时检测，不宜久置。

检测结果判定与卫生标准

结果判定依据现行一次性使用卫生用品卫生标准中对原材料微生物限量的规定执行。细菌菌落总数与真菌菌落总数须不超过对应限量要求；大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌四项致病菌在任何被检样品中均不得检出。报告出具前须复核样品信息、稀释倍数、培养条件与计数过程的完整性。若任一致病菌确证检出，则该批次样品卫生评价判定为不合格。检测结果应结合采样背景、样品状态综合评估，必要时进行复测确认，检测报告须注明检测方法、判定依据与样品批次信息，保证结果可追溯。